دانلود پایان نامه ارشد:طراحی و استقرار روش جدید سم زدایی سریع از واكسن سیاه سرفه |
3-3-2-3. مراحل انجام کشت فرمانتوری باکتری سیاه سرفه…………………………………………………………….. 57
3-3-2-3-1. استریلیزاسیون فرمانتور…………………………………………………………………………………………………… 57
3-3-2-3-2. آماده سازی و بهینه سازی محیط کشت فرمانتوری……………………………………………………… 58
3-3-2-3-3. تلقیح بذر به محیط کشت در فرمانتور…………………………………………………………………………… 58
3-3-3. جداسازی باکتری سیاه سرفه از محیط کشت…………………………………………………………………………. 59
3-3-3-1. جداسازی سلول باکتری با استفاده از سانتریفوژ…………………………………………………………………. 59
3-3-3-2. جداسازی سلول باکتری با استفاده از سیستم میکرو فیلتراسیون……………………………………. 59
3-3-4. غیرفعال سازی سلول باکتری سیاه سرفه………………………………………………………………………………… 60
3-3-5. سمیت زدایی سوسپانسیون باکتری سیاه سرفه………………………………………………………………………. 60
3-3-5-1. سمیت زدایی با استفاده از فرمالین……………………………………………………………………………………… 61
3-3-5-2. سمیت زدایی با استفاده از تیومرسال………………………………………………………………………………….. 61
3-3-6. تست های کنترلی سوسپانسیون سیاه سرفه…………………………………………………………………………… 61
3-3-6-1. تست استریلیتی……………………………………………………………………………………………………………………. 61
3-3-6-2. تست کنترل غیرفعال بودن باكتری…………………………………………………………………………………….. 62
3-3-6-3. تست کنترل سمیت زدایی (MWGT) …………………………………………………………………………… 62
3-3-6-4. تست توانمندی……………………………………………………………………………………………………………………… 62
فصل چهارم: نتایج
4-1. تجدید حیات بذر بر روی محیط بورده ژانگو………………………………………………………………………………… 64
4-2. تهیه بذر در محیط وِروِی……………………………………………………………………………………………………………….. 64
4-3. کشت فرمانتوری باکتری سیاه سرفه برای تولید واکسن……………………………………………………………… 64
4-4. جداسازی باکتری سیاه سرفه از کشت………………………………………………………………………………………….. 67
4-5. غیرفعال سازی و سمیت زدایی باکتری سیاه سرفه برای تولید واکسن……………………………………… 69
4-5-1. سمیت زدایی با فرمالین…………………………………………………………………………………………………………….. 69
4-5-2. سمیت زدایی با تیومرسال…………………………………………………………………………………………………………. 69
4-6. آزمایش های کنترلی سوسپانسیون های سیاه سرفه……………………………………………………………………. 69
4-7. نتایج حاصل از آزمون MWG در کنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سلولی سیاه سرفه
سمیت زدایی شده با فرمالین و تیومرسال…………………………………………………………………………………………….. 72
4-8. آزمون MWG و مقایسه تغییرات اوزان موش ها……………………………………………………………………….. 75
4-9. تست توانمندی واکسن های آزمایشی سیاه سرفه……………………………………………………………………….. 80
فصل پنجم: بحث و پیشنهادات
بحث ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 83
نتیجه گیری و پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………………. 88
منابع………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 89
خلاصه انگلیسی ……………………………………………………………………………………………………………………………………. 97
ضمایم ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 98
فهرست جداول
عنوان صفحه
جدول1-1. آنتی ژن های مختلف سیاه سرفه…………………………………………………………………………………………… 9
3-3-2-3. مراحل انجام کشت فرمانتوری باکتری سیاه سرفه…………………………………………………………….. 57
3-3-2-3-1. استریلیزاسیون فرمانتور…………………………………………………………………………………………………… 57
3-3-2-3-2. آماده سازی و بهینه سازی محیط کشت فرمانتوری……………………………………………………… 58
3-3-2-3-3. تلقیح بذر به محیط کشت در فرمانتور…………………………………………………………………………… 58
3-3-3. جداسازی باکتری سیاه سرفه از محیط کشت…………………………………………………………………………. 59
3-3-3-1. جداسازی سلول باکتری با استفاده از سانتریفوژ…………………………………………………………………. 59
3-3-3-2. جداسازی سلول باکتری با استفاده از سیستم میکرو فیلتراسیون……………………………………. 59
3-3-4. غیرفعال سازی سلول باکتری سیاه سرفه………………………………………………………………………………… 60
3-3-5. سمیت زدایی سوسپانسیون باکتری سیاه سرفه………………………………………………………………………. 60
3-3-5-1. سمیت زدایی با استفاده از فرمالین……………………………………………………………………………………… 61
3-3-5-2. سمیت زدایی با استفاده از تیومرسال………………………………………………………………………………….. 61
3-3-6. تست های کنترلی سوسپانسیون سیاه سرفه…………………………………………………………………………… 61
3-3-6-1. تست استریلیتی……………………………………………………………………………………………………………………. 61
3-3-6-2. تست کنترل غیرفعال بودن باكتری…………………………………………………………………………………….. 62
3-3-6-3. تست کنترل سمیت زدایی (MWGT) …………………………………………………………………………… 62
3-3-6-4. تست توانمندی……………………………………………………………………………………………………………………… 62
فصل چهارم: نتایج
4-1. تجدید حیات بذر بر روی محیط بورده ژانگو………………………………………………………………………………… 64
4-2. تهیه بذر در محیط وِروِی……………………………………………………………………………………………………………….. 64
4-3. کشت فرمانتوری باکتری سیاه سرفه برای تولید واکسن……………………………………………………………… 64
4-4. جداسازی باکتری سیاه سرفه از کشت………………………………………………………………………………………….. 67
4-5. غیرفعال سازی و سمیت زدایی باکتری سیاه سرفه برای تولید واکسن……………………………………… 69
4-5-1. سمیت زدایی با فرمالین…………………………………………………………………………………………………………….. 69
4-5-2. سمیت زدایی با تیومرسال…………………………………………………………………………………………………………. 69
4-6. آزمایش های کنترلی سوسپانسیون های سیاه سرفه……………………………………………………………………. 69
4-7. نتایج حاصل از آزمون MWG در کنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سلولی سیاه سرفه
سمیت زدایی شده با فرمالین و تیومرسال…………………………………………………………………………………………….. 72
4-8. آزمون MWG و مقایسه تغییرات اوزان موش ها……………………………………………………………………….. 75
4-9. تست توانمندی واکسن های آزمایشی سیاه سرفه……………………………………………………………………….. 80
فصل پنجم: بحث و پیشنهادات
بحث ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 83
نتیجه گیری و پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………………. 88
منابع………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 89
خلاصه انگلیسی ……………………………………………………………………………………………………………………………………. 97
ضمایم ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 98
فهرست جداول
عنوان صفحه
جدول1-1. آنتی ژن های مختلف سیاه سرفه…………………………………………………………………………………………… 9
جدول1-2. علائم کلینیکی بیماری سیاه سرفه……………………………………………………………………………………… 26
جدول1-3. آنتی بیوتیک های مورد استفاده در درمان سیاه سرفه حاد و رژیم مصرف آن……………….. 34
جدول1-4. واکسیناسیون سیاه سرفه در کشورهای مختلف…………………………………………………………………. 36
جدول2-1. ترکیب محیط لیستر و B2 بر اساس گرم در لیتر…………………………………………………………….. 45
جدول3-1. لیست دستگاه ها و تجهیزات مورد استفاده………………………………………………………………………… 51
جدول3-2. لیست مواد و محیط های مورد استفاده در تولید واکسن سیاه سرفه………………………………. 52
جدول3-3. ترکیبات محیط بورده ژانگو………………………………………………………………………………………………….. 53
جدول3-4. ترکیبات محیط کشت وِروِی………………………………………………………………………………………………… 53
جدول3-5. ترکیبات محیط کشت B2…………………………………………………………………………………………………… 54
جدول3-6. ترکیبات محیط کشت سویابین کازئین………………………………………………………………………………. 55
جدول4-1. اطلاعات دوره كشت باكتری سیاه سرفه برای تولید واكسن…………………………………………….. 68
جدول4-2. نتایج حاصل از انجام آزمایش های غیرفعال سازی و استریلیتی سوسپانسیون های باكتری سیاه سرفه سمیت زدایی شده با فرمالین……………………………………………………………………………………………………………………………….. 70
جدول4-3. نتایج حاصل از انجام آزمایش های غیرفعال سازی و استریلیتی سوسپانسیون های باكتری سیاه سرفه سمیت زدایی شده با تیومرسال…………………………………………………………………………………………………………………………….. 71
جدول4-4. نتایج حاصل از کنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سمیت زدایی شده با فرمالین و تیومرسال با استفاده از آزمون MWG………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 73
جدول4-5. نتایج كنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سمیت زدایی شده با فرمالین با استفاده از آزمون MWG 76
جدول4-6. نتایج كنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سمیت زدایی شده با تیومرسال با استفاده از آزمون MWG 77
جدول4-7. نتایج حاصل از انجام تست توانمندی برای شش واکسن تجربی سمیت زدایی شده با فرمالین (FDV) 80
این مطلب را هم بخوانید :
جدول4-8. نتایج حاصل از انجام تست توانمندی برای شش واکسن تجربی سمیت زدایی شده با تیومرسال (TDV) 81
فهرست نمودارها
عنوان صفحه
نمودار1-1. مقایسه تعداد افراد زیر یک سال ایمن شده با واکسن DTP در سه کشور مختلف در سال
2000 تا 2010 ………………………………………………………………………………………………………………………………………. 6
نمودار4-1. تغییرات pH کشت سویه 134 از باکتری سیاه سرفه در طول دوره رشد درفرمانتور….. 65
نمودار4-2. تغییرات pH کشت سویه 509 از باکتری سیاه سرفه در طول دوره رشد درفرمانتور….. 65
نمودار4-3. مقایسهی میانگین جذب نوری در طول موج های530 و590 در مقدار جرم باكتری در هنگام برداشت در بچ های مختلف سویه 134 و 509……………………………………………………………………………………………………………… 66
نمودار4-4. مقدار غلظت نهایی باكتری سیاه سرفه (cell109×1) سویه 134 در پایان دوره كشت در هنگام برداشت 66
نمودار4-5. مقدار غلظت نهایی باكتری سیاه سرفه (cell109×1) سویه 509 در پایان دوره كشت در هنگام برداشت 67
نمودار4-6. مقایسه دوره ی سمیت زدایی سوسپانسیون های سلولی سیاه سرفه سویه 134 توسط فرمالین و تیومرسال با استفاده از تست MWG ……………………………………………………………………………………………………………………….. 74
نمودار4-7. مقایسه دوره ی سمیت زدایی سوسپانسیون های سلولی سیاه سرفه در سویه 509 توسط فرمالین و تیومرسال با استفاده از تست MWG……………………………………………………………………………………………………………………….. 74
نمودار4-8. مقایسه اختلاف وزن موش های تزریق شده با واكسن تجربی سمیت زدایی شده با فرمالین نسبت به تیومرسال در سویه 134……………………………………………………………………………………………………………………………………………. 78
نمودار4-9. مقایسه اختلاف وزن موش های تزریق شده با واكسن تجربی سمیت زدایی شده با فرمالین
نسبت به تیومرسال در سویه 509………………………………………………………………………………………………………. 78
نمودار4-10. مقایسه اختلاف وزن موش های تزریق شده با سوسپانسیون های سمیت زدایی شده سویه 134 با تیومرسال و فرمالین نسبت به موش های گروه كنترل……………………………………………………………………………………………….. 79
نمودار4-11. مقایسه اختلاف وزن موش های تزریق شده توسط واكسن سیاه سرفه حاصل از سمیت
زدایی با فرمالین وتیومرسال در سمیت زدایی درسوش509 توسط تست MWG ……………………….. 79
نمودار4-12. مقایسه نتایج حاصل از توانمندی واكسن های تجربی سمیت زدایی شده با فرمالین (FDV) با واكسن های تجربی سمیت زدایی شده با تیومرسال((TDV …………………………………………………………………………………… 81
فهرست اشكال
جدول1-2. علائم کلینیکی بیماری سیاه سرفه……………………………………………………………………………………… 26
جدول1-3. آنتی بیوتیک های مورد استفاده در درمان سیاه سرفه حاد و رژیم مصرف آن……………….. 34
جدول1-4. واکسیناسیون سیاه سرفه در کشورهای مختلف…………………………………………………………………. 36
جدول2-1. ترکیب محیط لیستر و B2 بر اساس گرم در لیتر…………………………………………………………….. 45
جدول3-1. لیست دستگاه ها و تجهیزات مورد استفاده………………………………………………………………………… 51
جدول3-2. لیست مواد و محیط های مورد استفاده در تولید واکسن سیاه سرفه………………………………. 52
جدول3-3. ترکیبات محیط بورده ژانگو………………………………………………………………………………………………….. 53
جدول3-4. ترکیبات محیط کشت وِروِی………………………………………………………………………………………………… 53
جدول3-5. ترکیبات محیط کشت B2…………………………………………………………………………………………………… 54
جدول3-6. ترکیبات محیط کشت سویابین کازئین………………………………………………………………………………. 55
جدول4-1. اطلاعات دوره كشت باكتری سیاه سرفه برای تولید واكسن…………………………………………….. 68
جدول4-2. نتایج حاصل از انجام آزمایش های غیرفعال سازی و استریلیتی سوسپانسیون های باكتری سیاه سرفه سمیت زدایی شده با فرمالین……………………………………………………………………………………………………………………………….. 70
جدول4-3. نتایج حاصل از انجام آزمایش های غیرفعال سازی و استریلیتی سوسپانسیون های باكتری سیاه سرفه سمیت زدایی شده با تیومرسال…………………………………………………………………………………………………………………………….. 71
جدول4-4. نتایج حاصل از کنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سمیت زدایی شده با فرمالین و تیومرسال با استفاده از آزمون MWG………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 73
جدول4-5. نتایج كنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سمیت زدایی شده با فرمالین با استفاده از آزمون MWG 76
جدول4-6. نتایج كنترل توکسیسیتی سوسپانسیون های سمیت زدایی شده با تیومرسال با استفاده از آزمون MWG 77
جدول4-7. نتایج حاصل از انجام تست توانمندی برای شش واکسن تجربی سمیت زدایی شده با فرمالین (FDV) 80
جدول4-8. نتایج حاصل از انجام تست توانمندی برای شش واکسن تجربی سمیت زدایی شده با تیومرسال (TDV) 81
فهرست نمودارها
عنوان صفحه
نمودار1-1. مقایسه تعداد افراد زیر یک سال ایمن شده با واکسن DTP در سه کشور مختلف در سال
2000 تا 2010 ………………………………………………………………………………………………………………………………………. 6
نمودار4-1. تغییرات pH کشت سویه 134 از باکتری سیاه سرفه در طول دوره رشد درفرمانتور….. 65
نمودار4-2. تغییرات pH کشت سویه 509 از باکتری سیاه سرفه در طول دوره رشد درفرمانتور….. 65
نمودار4-3. مقایسهی میانگین جذب نوری در طول موج های530 و590 در مقدار جرم باكتری در هنگام برداشت در بچ های مختلف سویه 134 و 509……………………………………………………………………………………………………………… 66
نمودار4-4. مقدار غلظت نهایی باكتری سیاه سرفه (cell109×1) سویه 134 در پایان دوره كشت در هنگام برداشت 66
نمودار4-5. مقدار غلظت نهایی باكتری سیاه سرفه (cell109×1) سویه 509 در پایان دوره كشت در هنگام برداشت 67
نمودار4-6. مقایسه دوره ی سمیت زدایی سوسپانسیون های سلولی سیاه سرفه سویه 134 توسط فرمالین و تیومرسال با استفاده از تست MWG ……………………………………………………………………………………………………………………….. 74
نمودار4-7. مقایسه دوره ی سمیت زدایی سوسپانسیون های سلولی سیاه سرفه در سویه 509 توسط فرمالین و تیومرسال با استفاده از تست MWG……………………………………………………………………………………………………………………….. 74
نمودار4-8. مقایسه اختلاف وزن موش های تزریق شده با واكسن تجربی سمیت زدایی شده با فرمالین نسبت به تیومرسال در سویه 134……………………………………………………………………………………………………………………………………………. 78
نمودار4-9. مقایسه اختلاف وزن موش های تزریق شده با واكسن تجربی سمیت زدایی شده با فرمالین
نسبت به تیومرسال در سویه 509………………………………………………………………………………………………………. 78
نمودار4-10. مقایسه اختلاف وزن موش های تزریق شده با سوسپانسیون های سمیت زدایی شده سویه 134 با تیومرسال و فرمالین نسبت به موش های گروه كنترل……………………………………………………………………………………………….. 79
نمودار4-11. مقایسه اختلاف وزن موش های تزریق شده توسط واكسن سیاه سرفه حاصل از سمیت
زدایی با فرمالین وتیومرسال در سمیت زدایی درسوش509 توسط تست MWG ……………………….. 79
نمودار4-12. مقایسه نتایج حاصل از توانمندی واكسن های تجربی سمیت زدایی شده با فرمالین (FDV) با واكسن های تجربی سمیت زدایی شده با تیومرسال((TDV …………………………………………………………………………………… 81
فهرست اشكال
فرم در حال بارگذاری ...
[چهارشنبه 1399-07-02] [ 01:00:00 ق.ظ ]
|