کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل


آخرین مطالب


 

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کاملکلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

لطفا صفحه را ببندید کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

لطفا صفحه را ببندید

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

لطفا صفحه را ببندید

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

لطفا صفحه را ببندید

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

لطفا صفحه را ببندید

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

لطفا صفحه را ببندید

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

لطفا صفحه را ببندید

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

کلیه مطالب این سایت فاقد اعتبار و از رده خارج است. تعطیل کامل

Purchase guide distance from tehran to armenia

 



 

فهرست نمودارها

 

 

2-1: میزان بروز بیماری سل در طول 46 سال گذشته در ایران 41
4-1: نتایج کشت مثبت 92
4-2: منحنی استاندارد 98

 

فهرست جداول

 

 

2-1:  تاکسونومی اعضای کمپلکس توبرکلوزیس 15
2-2: داروهای خط دوم درمان توبركلوزیس 32
2-3: تخمین موارد ومتوسط میزان بروز سل در جهان در سال2010 40
2-4: به تفکیک دانشگاه­های علوم پزشکی کشور 42
2-5: برخی تغییرات ژنی در سویه­های BCG  M. bovis 47
3-1: نحوه گزارش میکروسکوپی 71
3-2: مواد تشکیل­دهنده بافرتخلیص 81
3-3: مواد تشکیل­دهنده محلول PBS x10 83
3-4: مواد تشکیل­دهنده محلول برادفورد 85
3-5: مواد تشکیل­دهنده Running Buffer 10% 86
3-6: مواد تشکیل­دهنده Coomassie Gel stain 87
3-7: مواد تشکیل­دهنده Coomassie Gel Destain 87
3-8: مواد تشکیل­دهنده Fixation solution 87
3-9: مواد تشکیل­دهنده Stainining solution 88
3-10: مواد تشکیل­دهنده ژل 10%,12.5%   Separating 89
3-11: مواد تشکیل­دهنده ژل  Stacking 5% 89
4-1: درصد نمونه­های بالینی 93
4-2: نتایج تست­های بیوشیمیایی 96
4-3: نتایج تست­های حساسیت آنتی­بیوتیکی و  TCH 97
فهرست تصاویر
2-1: استخوان سـتون فقرات بدشـکل در مومیایی، به­دلیل بیماری سـل 11
2-2: عکس­برداری توسط میکروسکوپ الکترونی از مایکوباکتریوم توبرکلوزیس 16
2-3: کلنی­های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس روی محیط لونشتاین جانسون 17
2-4: نمای شماتیک ازساختمان دیواره مایکوباکتریوم توبرکلوزیس 22
2-5: میزان بروز مایکوباکتریوم توبرکلوزیس درنقاط مختلف جهان در سال 2012 40
2-6: درخت تبارشناسی زیرسویه­های مختلف BCG M. bovis بر اساس اطلاعات پراکندگی آن­ها و خصوصیات مولکولی 46
2-7: برخی از عکس­های تاریخی مربوط به کاشفان واکسن ب ث ژ 49
3-1: مرحله دیالیز 84
3-2: آماده­سازی صفحات شیشه­ای 88
4-1: باسیل اسید فست در رنگ امیزی اورامین 93
4-2: باسیل اسید فست در رنگ امیزی ذیل-نلسون 94
4-3: فاکتور طنابی (cord factor) 95
4-4: تفسیر تست نیترات 95
4-5: باندهای پروتئین­های غشایی سویه­های M. bovis و M. TB ، استخراج پروتئین به روش آمونیوم سولفات، ژل 10% و رنگ آمیزی آمیزی کوماسی بلو R-250 99 این مطلب را هم بخوانید :
دانلود پایان نامه درباره خودمختاری و آزادی
4-6: باندهای پروتئین­های غشایی سویه­های M. bovis و M. TB ، استخراج پروتئین به روش آمونیوم سولفات، ژل 10%  رنگ آمیزی Blue Silver Staining 100
4-7: باندهای پروتئین­های ترشحی سویه­های M. bovis و M. TB 101
5-1: تصویر A سویهM. tuberculosis H37Rv  و تصویرB سویه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس حساس 106
   
   
   
   

 

چکیده

مایکوباکتریوم توبرکلوزیس عامل بیماری سل می­باشد. از زمانی که سازمان جهانی بهداشت در سال 1993، توبرکلوزیس را به عنوان یک فوریت اعلام نمود، تا کنون کنترل آن به دلیل وجود سوش­های مقاوم به درمان و تداخل با بیماری ایدز دچار مشکل شده است. مایکوباکتریوم بوویس به عنوان عامل سل گاوی به صورت موردی انسان را نیز درگیر می کند و به عنوان یکی از معضلات بهداشتی با گستره جهانی محسوب می­شود. مبارزه با این آلودگی امروزه باعث گسترش بررسی آنتی­ژن­های باکتری به منظور دسترسی بیومارکرهای موثر در تشخیص، اهداف دارویی و اجزای واکسن مورد اهمیت واقع شده­­اند.

جهت مقایسه پروفایل پروتئینی سویه­های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس حساس به درمان و مایکوباکتریوم بوویس از کل نمونه­های ارسالی 6 ماهه اول سال 1392 به بخش مایکوباکتریولوژی انسیتو پاستور، 100 نمونه مورد ارزیابی قرار گرفت. در ابتدا نمونه­های کلینیکی با روش ان استیل- ال سیستئین- هیدروکسید سدیم و در محیط کشت لونشتاین جانسون کشت داده شد و جهت افتراق مایکوباکتریوم توبرکلوزیس حساس و مایکوباکتریوم بوویس از سایر مایکوباکتریوم­ها، از تستهای بیوشیمیایی (نیترات، کاتالاز، نیاسین و TCH) و حساسیت آنتی بیوتیکی استفاده شد. کلونی­ها در محیط میدل بروک 7H9 کشت داده شد، پس از برداشت کلونی­های جدید، به منظور استخراج پروتئین­های ترشحی و غشایی از روشهای سونیکاسیون، رسوب دهی با سولفات آمونیوم و الکل استفاده گردید و به وسیله روش برادفورد تعیین غلظت شد  و در نهایت مقایسه با روش الکتروفورز تک بعدی انجام پذیرفت.

با بررسی باندهای حاصله از پروتئین­های غشایی و ترشحی در 5 سویه کلینیکی متفاوت مایکوباکتریوم توبرکلوزیس حساس هیچگونه تفاوتی مشاهده نشد و همچنین در 5 سویه کلینیکی متفاوت مایکوباکتریوم بوویس نیز تفاوتی مشاهده نشد. در سویه­های مایکوباکتریوم بوویس، برای پروتئین­های غشایی باندهایی در محدوده 15 تا 85 کیلودالتون مشاهده شد و در سویه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس حساس نیز باندهای از 15 تا 120 کیلودالتون مشاهده شد این دو سویه در محدوده­های وزنی تقریبا 30 تا 116 کیلو دالتون بسیار متفاوت بوده­اند.

در بررسی پروتئین­های ترشحی در سویه­های مایکوباکتریوم بوویس، باندهایی در محدوده 15 تا 115 کیلودالتون و در سویه­های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس حساس باندهایی از 18 تا 114 کیلودالتون مشاهده شدند که اختلافات وزنی کمی در این محدوده­ها مشاهده شد.

نتایج حاصل از تفکیک باندهای پروتئینی سویه­های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس حساس، حاکی از شباهت نسبی با سویه استانداردM. tuberculosis H37Rv  نسبت به مطالعات دیگر است. اختلافات مشاهده

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...

[چهارشنبه 1399-07-02] [ 02:26:00 ق.ظ ]




 

 

موضوع:

بررسی میزان آپوپتوز و قطعه قطعه شدن DNA اسپرم انسانی پس از روش   Swim-up در زمان های مختلف

 

اساتید راهنما:

دکتر فاطمه رودباری

دکتر محمد علی خلیلی

 

بهمن ماه 1391

برای رعایت حریم خصوصی نام نگارنده پایان نامه درج نمی شود

(در فایل دانلودی نام نویسنده موجود است)

تکه هایی از متن پایان نامه به عنوان نمونه :

(ممکن است هنگام انتقال از فایل اصلی به داخل سایت بعضی متون به هم بریزد یا بعضی نمادها و اشکال درج نشود ولی در فایل دانلودی همه چیز مرتب و کامل است)

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                          صفحه

فصل اول- مقدمه……………………………………………………………………………………………………………………………………….1

1-1- روش های كمك باروری………………………………………………………………………………………………………………….2

1-2- ناباروری……………………………………………………………………………………………………………………………………………5

1-3- تولید اسپرم …………………………………………………………………………………………………………………………………….5

1-4- مایع انزالی………………………………………………………………………………………………………………………………………..6

1-4-1- آنالیز مایع انزالی………………………………………………………………………………………………………………………….7

1-5- پارامترهای اسپرم………………………………………………………………………………………………………………………….10

1-5-1- مورفولوژی…………………………………………………………………………………………………………………………………10

1-5-2- تحرک اسپرم…………………………………………………………………………………………………………………………….12

1-5-3- درجه بندی تحرک اسپرم ……………………………………………………………………………………………………….14

1-5-4- قابلیت حیات اسپرم………………………………………………………………………………………………………………….14

1-5-5- حجم………………………………………………………………………………………………………………………………………….15

1-5-6- غلظت………………………………………………………………………………………………………………………………………..16

1-6- انواع مرگ سلولی و تعریف آن………………………………………………………………………………………………………18

1-6-1- نکروز…………………………………………………………………………………………………………………………………………18

1-6-2- آپوپتوز سلولی…………………………………………………………………………………………………………………………..18

1-6-2-1 مراحل آپوپتوز ……………………………………………………………………………………………………………………….19

1-6-2-2 مسیر های آپوپتوز………………………………………………………………………………………………………………….21

1-6-2-3- عناصر کلیدی مسیرهای آپوپتوز………………………………………………………………………………………….21

1-6-2-4- روش های بررسی آپوپتوز …………………………………………………………………………………………………..23

1-6-2-4-1-  بررسی تغییرات غشاء پلاسمایی در مرگ سول ……………………………………………………………23

1-6-2-4-1-1- تعیین فسفاتیدیل سرین سطح بیرونی غشاء سلول……………………………………………………24

1-6-2-4-2-  بررسی سیتوتوکسیسیتی ………………………………………………………………………………………………24

1-6-2-4-3-  بررسی تغییرات مورفولوژی …………………………………………………………………………………………..25

1-6-2-4-3-1-  استفاده از میکروسکوپ الکترونی………………………………………………………………………………25

1-6-2-4-3-2-  استفاده از میکروسکوپ نوری وفلورسانس………………………………………………………………..25

1-7-  منشاء آسیب DNA اسپرم…………………………………………………………………………………………………………26

1-7-1-  بسته بندی غیرطبیعی كروماتین……………………………………………………………………………………………27

1-8-  ساختار کروماتین اسپرم و تأثیر آن بر ناباروری …………………………………………………………………………28

1-8-1-  بررسی ساختار کروماتین اسپرم……………………………………………………………………………………………..28

1-9-  نقش آپوپتوز در آسیب DNA اسپرم………………………………………………………………………………………..29

1-10-  استرس اكسیداتیو به واسطه ROS…………………………………………………………………………………………30

1-11-  تاثیر عوامل محیطی برسلامت DNA  و میزان موفقیت روشهای کمک باروری…………………..31

1-11-1-  مصرف سیگار………………………………………………………………………………………………………………………..31

1-11-2-  مواجهات شغلی…………………………………………………………………………………………………………………….32

1-11-3-  داروهای شیمی درمانی و رادیوتراپی……………………………………………………………………………………33

1-11-4-  سن………………………………………………………………………………………………………………………………………..33

1-12-  تكنیك­های بررسی ساختار كروماتین……………………………………………………………………………………….33

1-12-1-  روش­های تعیین آسیب DNA اسپرم انسان………………………………………………………………………34

1-12-1-1- تست TUNEL……………………………………………………………………………………………………………….35

1-12-1-2- روش DBD-FISH………………………………………………………………………………………………………..35

1-12-1-3- روش Comet…………………………………………………………………………………………………………………..36

1-12-1-4- رنگ­آمیزی CMA3…………………………………………………………………………………………………………36

1-12-1-5- تكنیك SCSA………………………………………………………………………………………………………………..37

1-12-1-6- تست  SCD……………………………………………………………………………………………………………………..37

1-12-1-7- رنگ­آمیزی آكریدین اورانژ………………………………………………………………………………………………..39

1-12-1-8- رنگ­­آمیزی تولوئیدین بلو………………………………………………………………………………………………….39

1-13- روش مهاجرت اسپرم………………………………………………………………………………………………………………….39

1-14- روش سانتریفیوژ شیب غلظت…………………………………………………………………………………………………….40

فصل دوم- مواد و روش ها………………………………………………………………………………………………………………………41

2-1- مواد و وسایل  مورد نیاز…………………………………………………………………………………………………………………42

2-1-1- وسایل مورد نیاز………………………………………………………………………………………………………………………….42

2-1-2- مواد مورد نیاز……………………………………………………………………………………………………………………………..42

2-2- ساخت محلول های مورد نیاز…………………………………………………………………………………………………………45

2-2-1- ساخت محلول Ham’s F10…………………………………………………………………………………………………….45

2-2-2- محلول های لازم برای تست پراکندگی کروماتین اسپرم (SCD)…………………………………………..46

2-2-3- ساخت محلول تانل……………………………………………………………………………………………………………………..46

2-2-4- ساخت محلول (PBS)……………………………………………………………………………………………………………….46

2-2-5- ساخت رنگ ائوزین-نیگروزین…………………………………………………………………………………………………….47

2-2-6- ساخت رنگ رایت………………………………………………………………………………………………………………………..47

2-3- روشها………………………………………………………………………………………………………………………………………………..48

2-3-1- روش جمع آوری اسپرم…………………………………………………………………………………………………………….. 48

2-3-2- آنالیز مایع انزالی………………………………………………………………………………………………………………………… 48

2-3-2-1- آزمایشات ماکروسکوپی…………………………………………………………………………………………………………..48

2-3-2-1-1-  ظاهر………………………………………………………………………………………………………………………………….48

2-3-2-1-2- آبکی کردن…………………………………………………………………………………………………………………………48

2-3-2-1-3-  حجم………………………………………………………………………………………………………………………………….48

2-3-2-1-4-  چسبندگی…………………………………………………………………………………………………………………………48

2-3-2-2- آزمایشات میکروسکوپی………………………………………………………………………………………………………….49

2-3-2-2-1- آگلوتیناسیون……………………………………………………………………………………………………………………..50

2-3-2-2-2- بررسی تعداد اسپرم…………………………………………………………………………………………………………..50

2-3-2-2-2-1- روش استفاده از MAKLER CHAMBER برای شمارش ………………………………………..50

2-3-2-2-3- ارزیابی تحرک……………………………………………………………………………………………………………………51

2-3-2-2-3-1- روش کار……………………………………………………………………………………………………………………….52

2-3-2-2-4- ارزیابی قابلیت حیات…………………………………………………………………………………………………………53

2-3-2-2-4-1- روش کار رنگ آمیزی ائوزین-نیگروزین………………………………………………………………………53

2-3-2-2-5- ارزیابی مورفولوژی………………………………………………………………………………………………………………54

2-3-2-2-5-1- رنگ آمیزی پاپانیکولا……………………………………………………………………………………………………54

2-3-2-2-5-2- روش فیکس کردن………………………………………………………………………………………………………..54

2-3-2-2-5-3-روش رنگ آمیزی پاپانیکولا……………………………………………………………………………………………55

2-3-3-  Direct swim-up………………………………………………………………………………………………………………………57

2-3-3-1- روش کار………………………………………………………………………………………………………………………………….57

2-3-4- تست بررسی میزان پراکندگی کروماتین اسپرم (SCD)……………………………………………………………58

2-3-4-1- روش کار…………………………………………………………………………………………………………………………………58

2-3-5- روش رنگ آمیزی تانل…………………………………………………………………………………………………………………60

2-3-6- آنالیز آماری………………………………………………………………………………………………………………………………….62

فصل سوم- نتایج………………………………………………………………………………………………………………………………………..63

3-1 نتایج اثر آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی تحرک اسپرم………………………………64

3-2- نتایج اثر آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قابلیت حیات اسپرم………………….67

3-3- نتایج اثر آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی مورفولوژی اسپرم……………………..68

3-4- نتایج اثر آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قطعه قطعه شدن DNA اسپرم………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….70

3-5- نتایج اثر زمان های مختلف انکوباسیون(3،2،1،0ساعت) بعد از  آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قطعه قطعه شدن DNA اسپرم………………………………………………………………………………….72

 

این مطلب را هم بخوانید :

3-6- نتایج اثر زمان های مختلف انکوباسیون(3،2،1،0ساعت) بعد از  آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی آپوپتوز اسپرم………………………………………………………………………………………………………………75

3-7- رابطه میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم با سایر پارامترهای اسپرم……………………………………78

3-8- رابطه میزان آپوپتوز اسپرم با سایر پارامترهای اسپرم…………………………………………………………………..79

3-9- رابطه میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم با میزان آپوپتوز اسپرم…………………………………………..80

3-10- نتایج کلی……………………………………………………………………………………………………………………………………80

فصل چهارم- بحث………………………………………………………………………………………………………………………………….81

4-1- تا ثیر روش آماده سازی Dricct Swim up بر روی پارامترهای اسپرم………………………………………83

4-2- تاثیر زمان های مختلف انکوباسیون اسپرم در دمای 37 درجه سانتی گراد بر روی قطعه قطعه شدن DNA و آپوپتوز اسپرم…………………………………………………………………………………………………………………..84

4-3- پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………………………………………….90

منابع

چکیده انگلیسی

فهرست شکل ها

 1-1- ساختار اسپرم انسانی……………………………………………………………………………………………………………………..9

1-2- ارزیابی آسیب DNA توسط: …………..…………….…A.TUNEL, B.COMET, C.CMA337

1-3- تست  SCD………………………………………………………………………………………………………………………………….38

پایان نامه

 

2-1- انواع مختلف آگلوتیناسیون…………………………………………………………………………………………………………..50

2-2- MAKLER CHAMBERبرای شمارش اسپرم استفاده می شود………………………………………………51

2 -3- شکل لامل MAKLER CHAMBER …………………………………………………………………………………….52

2-4- چگونگی قرارگیری لوله فالکون بازاویه 45 درجه در انکوباتور…………………………………………………….57

3-1- رنگ آمیزی ائوزین-نیگروزین برای سنجش میزان زنده یا مرده بودن اسپرم…………………………….67

3-2- رنگ آمیزی پاپانیکولا ………………………………………………………………………………………………………………….69

3-3- تست SCD برای بررسی میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم میباشد……………………………………74

 3-4- رنگ آمیزی TUNEL………………………………………………………………………………………………………………….76

 

فهرست جدول ها

1-1 : خصوصیات میکرسکوپی نمونه انزال طبیعی مطابق با استاندارد های سازمان بهداشت جهانی (2010/WHO)…………………………………………………………………………………………………………………………………….17

2-1- ساخت Ham’sf10……………………………………………………………………………………………………………………..45

2-2- محلول های لازم برای رنگ آمیزی پاپانیکولا………………………………………………………………………………55

3-1-مقایسه پارامترهای اسپرمی قبل و بعد از آماده سازی اسپرم ……………………………………………………..71

3-2-مقایسه میانگین اثر زمان های مختلف انکوباسیون(3،2،1،0ساعت) بعد از  آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قطعه قطعه شدن DNA آپوپتوز اسپرم………………77

3-3-مقایسه مقدار P اثر زمان های مختلف انکوباسیون(3،2،1،0ساعت) بعد از  آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قطعه قطعه شدن DNA و آپوپتوز اسپرم…………………………………..77

3-4- رابطه میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم با سایر پارامترهای اسپرم……………………………………78

3-5- رابطه میزان آپوپتوز اسپرم با سایر پارامترهای اسپرم………………………………………………………………….79

فهرست نمودارها

3-1- مقایسه میانگین حرکت پیشرونده، حرکت سریع و حرکت کند قبل و بعد از آماده سازی اسپرم به روش Swim-up……………………………………………………………………………………………………………………………….66

3-2- مقایسه میانگین قابلیت حیات و مورفولوژی اسپرم قبل و بعد از آماده سازی به روش  Swim-up…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..68

3-3- مقایسه میانگین حرکت پیشرونده و قطعه قطعه شدن DNA اسپرم قبل و بعد از آماده سازی به روش   Swim-up………………………………………………………………………………………………………………………………..70

3-4- مقایسه میانگین قطعه قطعه شدن DNA  اسپرم در زمان های مختلف انکوباسیون بعد از آماده سازی به روش  Swim-up…………………………………………………………………………………………………………………..73

3-5- مقایسه میانگین آپوپتوز  اسپرم در زمان های مختلف انکوباسیون بعد از آماده سازی به روش  Swim-up……………………………………………………………………………………………………………………………………………76

 

چکیده

یکی از علت های شکست و عدم موفقیت در تکنیک های کمک باروری(ART) قطعه قطعه شدن DNA اسپرم انسانی است، که ممکن است با انکوباسیون طولانی مدت اسپرم در دمای 37 درجه سانتی گراد به وجود آید. لذا در این مطالعه میزان قطعه قطعه شدن و آپوپتوز DNA اسپرم انسانی بعد از آماده سازی به روش Direct swim-up در زمان های مختلف انکوباسیون به وسیله تست SCD و تکنیک TUNEL مورد ارزیابی قرار گرفت.

در این مطالعه آینده نگر، بیست ویک نمونه ی اسپرم نرمال مورد مطالعه قرار گرفت. برای بررسی مورفولوژی اسپرم از رنگ آمیزی  Papanicolaou و قابلیت حیات اسپرم از رنگ آمیزی Eosin-Nigrosin  استفاده شد. نمونه ها در دمای 37 درجه سانتی گراد بعد از آماده سازی به روش Direct swim-up در زمان های مختلف انکوبه شدند. قطعه قطعه شدن DNA در فواصل زمانی مختلف (3،2،1،0 ساعت) با استفاده از تست SCD مورد بررسی قرار گرفت. اسپرم های دارای هاله بزرگ و متوسط، DNA سالم داشتند و اسپرم هایی که دارای هاله کوچک و بدون هاله بودند DNA قطعه قطعه شده داشتند. میزان آپوپتوز نیز به وسیله تکنیک TUNEL مورد ارزیابی قرار گرفت.

میانگین مورفولوژی نرمال و حرکت پیشرونده اسپرم بعد از آماده سازی به روش Direct swim-up  53/2±33/72 و 02/1±10/90 بوده است. میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم به میزان معنی داری افزایش یافت بعد از دو ساعت (935/0±81/8، 004/0 P=) و بعد از سه ساعت (894/0±76/10، 0001/0 P=) انکوباسیون نسبت به زمان صفر (809/0±38/4) بوده است. همچنین میزان آپوپتوز DNA اسپرم در زمان دو ساعت انکوباسیون نسبت به زمان صفر  (864/0±19/9، 008/0 P=) و نیز زمان سه ساعت نسبت به زمان یک ساعت ( 7/0±97/10، 002/0 P=) انکوباسیون معنی دار شده است.

در نهایت نتیجه ای که ما به آن دست یافته ایم نشان می دهد که انکوباسیون اسپرم نرمال در دمای 37 درجه سانتی گراد که به روش Direct swim-up آماده شده برای استفاده در تکنینک های کمک باروری (ART) باید زمانی کمتر از دو ساعت باشد.

واژه های کلیدی:

اسپرم نرمال، قطعه قطعه شدن DNA، انکوباسیون، تست SCD، تکنیک TUNEL.

فصل اول

مقدمه

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...

 [ 02:26:00 ق.ظ ]




3-3-1-3- دلایل استفاده از مدل تعدیل شده بازار.. 67

3-3-1-4- بازده غیر عادی.. 68

3-3-1-5- بازده غیر عادی انباشته. 69

3-3-2- درصد تغییر در سود نقدی.. 69

3-3-3- جریان نقد آزاد. 69

3-3-4- نسبت بدهی به حقوق صاحبان سهام. 71

3-3-5- نقدشوندگی.. 72

3-3-6- مالکیت نهادی.. 72

3-3-7- فرصت رشد. 73

3-4- ابزارها و روش­های جمع­آوری داده­ها 74

3-5- روش تجزیه و تحلیل داده ها و اطلاعات… 74

3-5- 1-رگرسیون خطی.. 74

3-5- 1-1-آزمون دوربین – واتسون.. 75

3-5- 1-2-بررسی نرمال بودن خطاها 75

3-5- 1-3- آزمون هم خطی.. 76

3-5- 1-4- راه حل های رفع هم خطی.. 76

3-5- 2- تخمین از  طریق روش داده­های تلفیقی.. 77

3-5- 2-1- مزایای استفاده از داده‌های تابلویی.. 78

3-5- 2-2- داده های تلفیقی متوازن و غیر متوازن.. 79

3-5- 2-3- مدل كلی داده‌های تابلویی.. 79

3-5- 2-3- تخمین زن های اثرات ثابت و تصادفی.. 81

3-5- 2-5- تشخیص استفاده از روش­ اثرات ثابت یا اثرات تصادفی.. 85

3-5- 2-5-1- آزمون F (آزمون برابری عرض از مبداء ها). 85

3-5- 2-5-2- آزمون هاسمن: انتخاب بین اثرات ثابت یا تصادفی.. 87

3-6- جمع بندی.. 88

فصل چهارم: روش تجزیه و تحلیل داده­ها. 89

4-1- مقدمه. 90

4-2- آمار توصیفی.. 90

4-2-1- متغیر­های مورد استفاده. 90

4-2-2- فراوانی شرکت­های مورد بررسی.. 91

4-2-3- آمار توصیفی هر یک از متغیرها 91

4-3-بررسی مفروضات رگرسیون.. 92

4-3-1-آزمون هم­خطی.. 92

4-3-2-آزمون استقلال خطاها 93

4-3-3-بررسی نرمال بودن توزیع  پسماندها.. 93

4-4- آزمون فرضیات… 94

4-5- نتایج آزمون فرضیات… 95

4-5-1- آزمون فرضیه اول.. 95

4-5-2- آزمون فرضیه 2.. 96

4-5- 3-آزمون فرضیه 3 و 4.. 97

4-5-4- آزمون فرضیه 5 و 6.. 97

4-5-5- آزمون فرضیه 7 و 8.. 98

4-5-6- آزمون فرضیات 9 و 10.. 99

4-5-7- آزمون فرضیات 11 و 12.. 100

4-5-8- آزمون فرضیات 13 و 14.. 101

4-6-جمع­بندی.. 101

فصل پنجم: نتیجه­گیری و پیشنهادات. 103

5-1- مقدمه. 104

5-2- نتایج حاصل از بررسی سؤال­ها و فرضیه­های پژوهشی.. 104

5-2- 1-نتایج حاصل از فرضیات اول و دوم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 105

5-2-2- نتایج حاصل از فرضیات سوم و چهارم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 106

5-2-3- نتایج حاصل از فرضیات پنجم و ششم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 106

5-2-4- نتایج حاصل از فرضیات هفتم و هشتم مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 107

5-2-5- نتایج حاصل از فرضیات نهم و دهم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 107

5-2-6- نتایج حاصل از فرضیات یازدهم و دوازدهم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 107

5-2-7-نتایج حاصل از فرضیات سیزدهم وچهاردهم و مقایسه نتایج باسایر تحقیقات انجام شده. 108

دانلود پایان نامه

 

5-3-پیشنهادات کاربردی.. 108

5-4- پیشنهادات برای تحقیقات آینده. 108

پیوست­ها. 110

منابع. 118

 

 

 

فهرست شکل­ها

عنوان                                                                                                         

این مطلب را هم بخوانید :

روش انتقال اعتبار بین سیم کارت‌های رایتل - مرکز آموزش علمی-کاربردی کاویان

صفحه

شکل2 -1- فرآیند پرداخت سود سهام. 20

شکل 2-2- مکاتب فکری در تقسیم سود. 22

شکل 2-3- روابط نمایندگی. 42

شکل 3-1- نمایش مراحل کلی انجام پژوهش. 64

 

 

 

 فهرست جدول­ها

عنوان                                                                                                         صفحه

جدول 4-1- تعریف متغیر­های تحقیق. 90

جدول4-2- فراوانی شرکت­های مورد بررسی در هر یک از فرضیات  91

جدول 4-3- آمار توصیفی هر یک از متغیرها. 91

جدول 4-4- بررسی استقلال متغیرهای تحقیق. 92

جدول 4-5- آزمون استقلال خطاها. 93

جدول 4-6- ارزش زمان. 95

جدول 4-7- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه 1. 95

جدول 4-8- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه 2. 96

جدول 4-9- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه­های 3 و 4. 97

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...

 [ 02:25:00 ق.ظ ]




4-1-3 نتایج به دست آمده با روش ایمونواسی.. 71 4-1-4 نتایج به دست آمده توسط کیت جستجوگر پنی‌سیلین: 93 4-2 بحث… 93 فصل 5 نتیجه‌گیری.. 97 5-1 پیشنهادات… 99 منابع و مراجع.. 101 فهرست جدول­ها جدول ‏3‑1: حلال‌های متداول برای فاز متحرك در HPLC.. 36 جدول ‏3‑2: فازهای ساكن HPLC و كاربردهای رایج آنها 39 جدول ‏3‑3: ستون‌های فاز برگشتی رایج و میزان قطبیت نسبی آنها 40 جدول ‏3‑4: طول و قطر داخلی ستون. 41 جدول ‏3‑5: تفسیر محیط TSI بر اساس عمق محیط.. 46 جدول ‏3‑6: تقسیر محیط TSI بر اساس سطح مایل محیط.. 46 جدول ‏3‑7: مشخصات سالمونلاها از نظر واکنش‌های بیوشیمیایی.. 48 جدول ‏4‑1: نتایج باقیمانده کلرامفنیکل جدا شده در 15 نمونه شیر (ppb) 58 جدول ‏4‑2: نتایج باقیمانده تتراسایکلین جدا شده در 15 نمونه شیر (ppb) 59 این مطلب را هم بخوانید : https://urlscan.io/result/aea36c72-32b5-4fc5-bf9a-a3931f6238a0/ جدول ‏4‑3: نتایج باقیمانده پنی‌سیلین جدا شده در 15 نمونه شیر (ppb) 60 جدول ‏4‑4: باقیمانده کلرامفنیکل جدا شده در 15 نمونه گوشت قرمز (ppb) 61 جدول ‏4‑5: باقیمانده تتراسایکلین جدا شده در 15 نمونه گوشت قرمز (ppb) 62 جدول ‏4‑6: باقیمانده پنی‌سیلین جدا شده در 15 نمونه گوشت قرمز (ppb) 63 جدول ‏4‑7: باقیمانده کلرامفنیکل جدا شده در 15 نمونه تخم مرغ (ppb) 64 جدول ‏4‑8: باقیمانده تتراسایکلین جدا شده در 15 نمونه تخم مرغ (ppb) 65 جدول ‏4‑9: باقیمانده پنی‌سیلین جدا شده در 15 نمونه تخم مرغ (ppb) 66 جدول ‏4‑10: باقیمانده کلرامفنیکل جدا شده در 15 نمونه گوشت سفید (ppb) 67 جدول ‏4‑11: باقیمانده تتراسایکلین جدا شده در 15 نمونه گوشت سفید (ppb) 68 جدول ‏4‑12: باقیمانده پنی‌سیلین جدا شده در 15 نمونه گوشت سفید (ppb) 69 جدول ‏4‑13: نتیجه جداسازی باکتری سالمونلا از 10 نمونه گوشت بسته‌بندی قرمز. 70 جدول ‏4‑14: جداسازی باکتری اشرشیاکلی از 10 نمونه گوشت بسته‌بندی قرمز. 71 جدول ‏4‑15: نتیجه جداسازی باکتری سالمونلا از 10 نمونه گوشت بسته‌بندی سفید. 71 جدول ‏4‑16: جداسازی باکتری اشرشیاکلی از 10 نمونه گوشت بسته‌بندی سفید. 72 جدول ‏4‑17: باکتری استافیلوکوک اورئوس کواگولاز مثبت از 10 نمونه گوشت بسته‌بندی سفید. 72 فهرست شکل­ها شکل ‏1‑1: فرمول ساختاری تتراسایکلین.. 8 شکل ‏1‑2: فرمول ساختاری اکسی‌تتراسایکلین.. 8 شکل ‏1‑3: فرمول ساختاری پنی‌سیلین.. 9 شکل ‏1‑4: فرمول ساختاری کلرامفنیکل. 9 شکل ‏4‑1: کروماتوگرام تزریق مسققیم محلول‌های مادر پنی‌سیلین.. 54 شکل ‏4‑2: کروماتوگرام تزریق مسققیم محلول‌های مادر کلرامفنیکل. 54 شکل ‏4‑3: کروماتوگرام تزریق مسققیم محلول‌های مادر تتراسایکلین.. 55 شکل ‏4‑4: کروماتوگرام پنی‌سیلین در نمونه‌های گوشت سفید. 55 شکل ‏4‑5: کروماتوگرام تتراسایکلین در نمونه‌های گوشت سفید. 56 شکل ‏4‑6: کروماتوگرام کلرامفنیکل در نمونه‌های گوشت سفید. 56 شکل ‏4‑7: کروماتو گرام پنی‌سیلین در نمونه‌های گوشت قرمز. 57 شکل ‏4‑8: کروماتوگرام تتراسایکلین‌ها در نمونه‌های گوشت قرمز. 57 شکل ‏4‑9: کروماتوگرام کلرامفنیکل در نمونه‌های گوشت قرمز. 58 شکل ‏4‑10: باقیمانده تتراسایکلین جدا شده در 15 نمونه شیر (ng/ml) 73 شکل ‏4‑11: باقیمانده تتراسایکلین جدا شده در 15 نمونه گوشت سفید (ng/ml) 76 شکل ‏4‑12: باقیمانده تتراسایکلین جدا شده در 15 نمونه گوشت قرمز (ng/ml) 79 شکل ‏4‑13: باقیمانده تتراسایکلین جدا شده در 15 نمونه تخم مرغ (ng/ml) 82 شکل ‏4‑14: باقیمانده کلرامفنیکل جدا شده در 15 نمونه شیر (ng/ml) 85 شکل ‏4‑15: باقیمانده کلرامفنیکل جدا شده در 15 نمونه تخم مرغ (ng/ml) 87 شکل ‏4‑16: باقیمانده کلرامفنیکل جدا شده در 15 نمونه گوشت سفید (ng/ml) 90 شکل ‏4‑17: باقیمانده کلرامفنیکل جدا شده در 15 نمونه گوشت قرمز(ng/ml) 93 شکل ‏5‑1: درصد نمونه‌های دارای باقیمانده کلرامفنیکل بیش از حد مجاز در دو روش تست.. 99 شکل ‏5‑2: درصد میانگین میزان باقیمانده تتراسایکلین نسبت به حد مجاز. 100 شکل ‏5‑3: درصد میانگین میزان باقیمانده پنی‌سیلین نسبت به حد مجاز در تست HPCL.. 100 چکیده این مطالعه بر روی 4 ماده غذایی مورد مصرف مردم انجام شد که شامل شیر، گوشت قرمز و سفید بسته‌بندی و تخم مرغ بود. از هر کدام از این مواد تعداد 15 نمونه از مناطق مختلف تهران در شهریور ماه 1391 جمع‌آوری شد. این نمونه‌ها برای بررسی 4 آنتی‌بیوتیک تتراسایکلین، اکسی‌تتراسایکلین، پنی‌سیلین و کلرامفنیکل با روش کروماتوگرافی مایع و ایمونواسی انتخاب شدند. در روش HPLC از ستون C18 و فاز متحرک (1 mil/min) که شامل استات آمونیوم، اسید استیک و متانول بود، استفاده شد. در روش آزمون الایزا از کیت‌های تشخیصی proximal استفاده شد. همچنین از کیت explore برای تشخیص حضور یا عدم حضور پنی‌سیلین به استفاده شد. تمامی نمونه‌های مورد آزمایش با روش HPLC باقیمانده دارویی کمتر از حد مجازهای تعیین شده نشان دادند به غیر از آنتی‌بیوتیک کلرامفنیکل که بالاتر از حد مجاز بود. این نتیجه در مورد آزمون الایزا نیز صادق بود. لازم به ذکر است که در بعضی از نمونه‌های شیر و تخم مرغ که به روش ایمونواسی اندازه‌گیری شدند، نتایج حاصل کمتر از حد تشخیص کیت بود که با HPLC به طور دقیق اندازه‌گیری شد. کیت جستجوگر پنی‌سیلین نشان از عدم حضور پنی‌سیلین در تمامی نمونه‌ها داشت. میزان بار میکروبی 3 باکتری سالمونلا و اشرشیاکلی و استافیلوکوک اورئوس کواگولاز مثبت در گوشت‌های بسته‌بندی بررسی شدند که سالمونلا در تمامی آنها منفی ولی باکتری اشرشیاکلی در تعدادی از نمونه‌ها بیشتر از حد مجاز تعیین شده بود. استافیلوکوک‌های جدا شده از گوشت‌های مرغ نیز کمتر از حد مجاز تعیین شده بود. داده‌های به دست آمده از روش‌های به کار گرفته در این مطالعه به طور کامل همدیگر را تأیید کرده و نشان از کیفیت انجام آزمون دارند. با توجه به نتایج به دست آمده مواد غذایی مورد آزمایش در این مطالعه از لحاظ باقیمانده پنی‌سیلین و تتراسایکلین‌ها برای مصرف افراد جامعه ضرری نداشته ولی از نظر باقیمانده کلرامفنیکل مصرف آن در دراز مدت ممکن است همراه با عوارض ناشی از باقیمانده‌های دارویی باشد. فصل 1

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...

 [ 02:24:00 ق.ظ ]




3-4-1 روش پرسشنامه ………………………………………………………… 83

3-4-2 مطالعات کتابخانه ای……………………………………………………. 83

3-4-3 مصاحبه…………………………………………………………………. 84

3-5 فرضیه تحقیق………………………………………………………………………. 85

3-6 متغیرهای تحقیق …………………………………………………………………… 85

3-7 مدل تحقیق………………………………………………………………………….. 86

3-8 روایی(اعتبار) و پایایی(اعتماد)…………………………………………………….. 88

3-9 روش تجزیه و تحلیل داده…………………………………………………………… 90

3-9-1 آزمونهای مورد استفاده در تحقیق……………………………………….. 90

3-9-2 نرم افزارهای بکار گرفته شده در تحقیق……………………………….. 93

فصل چهارم: تجزیه و تحلیل یافته ها …………………………………………………… 94

مقدمه…………………………………………………………………………………….. 95

4-1 آمار توصیفی و آمار استنباطی…………………………………………………….. 96

4-2 توزیع جامعه آماری بر حسب سن افراد……………………………………………. 98

4-3 توزیع جامعه آماری بر حسب سابقه کار…………………………………………… 98

4-4 توزیع جامعه آماری بر حسب جنسیت……………………………………………… 99

4-5 توزیع جامعه آماری بر حسب پست سازمانی………………………………………. 99

4-6 توزیع جامعه آماری بر حسب سطح تحصیلات……………………………………. 100

4-7 سوألات…………………………………………………………………………….. 100

4-8 فرضیه آماری و پژوهشی………………………………………………………… 110

4-9 تجزیه و تحلیل و آزمون فرضیه اول…………………………………………….. 110

4-10 تجزیه و تحلیل و آزمون فرضیه دوم……………………………………………. 111

4-11 تجزیه و تحلیل و آزمون فرضیه سوم…………………………………………… 112

4-12 تجزیه و تحلیل و آزمون فرضیه چهارم………………………………………… 113

4-13 تجزیه و تحلیل و آزمون فرضیه پنجم………………………………………….. 114

4-14 تجزیه و تحلیل و آزمون فرضیه ششم………………………………………….. 115

4-15 آزمون  فریدمن………………………………………………………………….. 117

فصل پنجم: نتیجه گیری و پیشنهادات…………………………………………………. 118

مقدمه……………………………………………………………………………………. 119

1-5 نتیجه گیری……………………………………………………………………….. 119

این مطلب را هم بخوانید :

1-1-5 فرضیه اول …………………………………………………………… 119

5-1-2 فرضیه دوم ……………………………………………………………. 120

5-1-3 فرضیه سوم……………………………………………………………. 121

5-1-4 فرضیه چهارم ………………………………………………………… 121

5-1-5 فرضیه پنجم ………………………………………………………….. 122

5-1-6 فرضیه ششم…………………………………………………………… 123

5-2 پیشنهادات حاصل از تحقیق………………………………………………………. 124

5-3 پیشنهادات جانبی………………………………………………………………….. 126

5-4 پیشنهادات برای تحقیقات آتی…………………………………………………….. 127

ضمائم و پیوستها………………………………………………………………………. 128

پیوست الف: پرسشنامه…………………………………………………………………. 129

پیوست ب: نتایج حاصل از روش دلفی………………………………………………… 132

منابع……………………………………………………………………………………. 133

منابع فارسی……………………………………………………………………………. 134

منابع انگلیسی………………………………………………………………………….. 136

چکیده انگلیسی…………………………………………………………………………. 138

 

فهرست جدول ها

جدول 2-1: انواع صکوک………………………………………………………………. 37

 

جدول 2-2: ویژگی های انواع نظام بانکداری………………………………………….. 46

جدول 3-1: نتایج آلفای کرونباخ………………………………………………………… 89

جدول 4-1: پرسشهای هر فرضیه………………………………………………………. 97

جدول 4-2: توزیع جامعه آماری بر حسب سن افراد……………………………………. 98

جدول 4-3: توزیع جامعه آماری بر حسب سابقه کار……………………………………. 98

جدول 4-4: توزیع جامعه آماری بر حسب جنسیت……………………………………… 99

جدول 3-5: توزیع جامعه آماری بر حسب پست سازمانی………………………………. 99

جدول 4-6: توزیع جامعه آماری بر حسب سطح تحصیلات……………………………. 100

جدول 4-7: سوأل 1…………………………………………………………………….. 100

جدول 4-8: سوأل 2…………………………………………………………………….. 101

جدول 4-9: سوأل 3…………………………………………………………………….. 101

جدول 4-10: سوأل 4………………………………………………………………….. 102

جدول 4-11: سوأل 5………………………………………………………………….. 102

جدول 4-12: سوأل 6………………………………………………………………….. 103

جدول 4-13: سوأل 7………………………………………………………………….. 103

جدول 4-14: سوأل 8………………………………………………………………….. 104

جدول 4-15: سوأل 9………………………………………………………………….. 104

جدول 4-16: سوأل 10………………………………………………………………… 105

جدول 4-17: سوأل 11………………………………………………………………… 105

جدول 4-18: سوأل 12………………………………………………………………… 106

جدول 4-19: سوأل 13………………………………………………………………… 106

جدول 4-20: سوأل 14………………………………………………………………… 107

جدول 4-21: سوأل 15………………………………………………………………… 107

جدول 4-22: سوأل 16………………………………………………………………… 108

جدول 4-23: سوأل 17………………………………………………………………… 108

جدول 4-24:سوأل 18…………………………………………………………………. 109

جدول 4-25: سوأل 19………………………………………………………………… 109

جدول شماره 4-26-1 و 4-26-2 آزمون فرضیه اول………………………………… 111

جدول شماره 4-27-1 و 4-27-2 آزمون فرضیه دوم…………………………………. 112

جدول شماره 4-28-1 و 4-28-2 آزمون فرضیه سوم………………………………… 113

جدول شماره 4-29-1 و 4-29-2 آزمون فرضیه چهارم………………………………. 114

جدول شماره 4-30-1 و 4-30-2 آزمون فرضیه پنجم   ……………………………… 115

جدول شماره 4-31-1 و 4-31-2 آزمون فرضیه ششم………………………………… 116

جدول شماره  4-32 آزمون  فریدمن…………………………………………………… 117

جدول شماره  ب-1 نتایج حاصل از روش دلفی……………………………………….. 132

 

فهرست نمودارها

نمودار 4-2: توزیع جامعه آماری بر حسب سن افراد…………………………………… 98

نمودار 4-3: توزیع جامعه آماری بر حسب سابقه کار…………………………………… 98

نمودار 4-4: توزیع جامعه آماری بر حسب جنسیت…………………………………….. 99

نمودار 3-5: توزیع جامعه آماری بر حسب پست سازمانی……………………………… 99

نمودار 4-6: توزیع جامعه آماری بر حسب سطح تحصیلات…………………………… 100

نمودار 4-7: سوأل 1……………………………………………………………………. 100

نمودار 4-8: سوأل 2……………………………………………………………………. 101

نمودار 4-9: سوأل 3……………………………………………………………………. 101

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...

 [ 02:23:00 ق.ظ ]